Prof. Dr. Li, Institut für Pharmazeutische Biologie
Thema 1: Herstellung biologisch aktiver Substanzen durch Einsatz von Enzymen
In den letzten Jahren konnten wir biosynthetische Enzyme im Sekundärstoffwechsel von Pilzen überproduzieren und biochemisch charakterisieren.
Im Wahlpflichtfachpraktikum sollen diese Enzyme als Tools zur Herstellung von biologisch aktiven Substanzen, wie z.B. Analoga von Tryprostatin B (Abb.), eingesetzt werden. Dafür werden die Enzyme in E. coli produziert, über Affinitätschromatographie gereinigt und für enzymatische Reaktionen mit verschiedenen Substraten eingesetzt. Die enzymatischen Produkte werden anschließend mittels HPLC isoliert und spektroskopisch (NMR MS) identifiziert.
Thema 2: Untersuchung zur Biosynthese von Alkaloiden in Aspergillus-Arten: Herstellung von Expressions- und Deletionskonstrukten
Die Gattung Aspergillus produziert diverse Sekundärstoffe, u. a. Indolalkaloide. Aus Genomsequenzen haben wir biosynthetische Gencluster für Substanzen dieser Gruppe identifiziert und experimentell nachgewiesen.
Im Wahlpflichtfachpraktikum sollen Konstrukte für Genexpression und Gendeletion hergestellt werden, um die Funktionen der einzelnen Gene nachweisen zu können. Dafür werden DNA-Fragmente aus genomischer oder cDNA mit Hilfe der PCR amplifiziert und in geeigneten Vektoren kloniert. Eine Sequenzierung der Konstrukte soll Fehler der PCR-Amplifikation ausschließen.
